網(wǎng)織紅細(xì)胞是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的不成熟紅細(xì)胞，通常較成熟紅細(xì)胞稍大，其胞質(zhì)中尚殘存部分嗜堿性物質(zhì)(RNA、核糖體)，經(jīng)堿性染料染色后可見深染的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名。

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是用作紅細(xì)胞產(chǎn)生或紅細(xì)胞生成的指標(biāo)，是診斷或監(jiān)測貧血治療最常用的臨床指標(biāo)。流式細(xì)胞術(shù)測量網(wǎng)織紅細(xì)胞不但大大提高了網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和精確性，還能提供一些反映網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度和大小的非傳統(tǒng)參數(shù)。臨床研究已經(jīng)開始將這些非傳統(tǒng)參數(shù)應(yīng)用于許多貧血性疾病的診斷和治療。

近年來，許多中、高端血細(xì)胞分析儀都配有自動的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析功能。網(wǎng)織紅細(xì)胞的全自動血液分析過程消除了手工涂片、染色和不同技師引起的偏差，可使實(shí)驗(yàn)更標(biāo)準(zhǔn)化。此外，同手工方法計(jì)數(shù)1000個(gè)細(xì)胞相比，自動的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析法分析30000個(gè)細(xì)胞，大大提高了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1. 在流式通道中，運(yùn)用VCS三維技術(shù)分析染色后的網(wǎng)織紅細(xì)胞：低頻波檢測細(xì)胞體積，網(wǎng)織紅細(xì)胞比成熟紅細(xì)胞稍大;高頻波檢測細(xì)胞的內(nèi)部成分，可剔除非紅細(xì)胞;激光散射將網(wǎng)織紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞區(qū)分開來，因?yàn)榫W(wǎng)織紅細(xì)胞胞漿含嗜堿性物質(zhì)，結(jié)合染料后散射較多的激光，在散點(diǎn)圖上分布于紅細(xì)胞的右側(cè)，網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度越差,在散點(diǎn)圖上分布越靠右。

2.VCS技術(shù)

細(xì)胞經(jīng)染色和漂洗后，采用一種獨(dú)特的流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)細(xì)胞，同時(shí)采用體積、傳導(dǎo)性和光散射三維分析來確定網(wǎng)織紅細(xì)胞。

體積檢測用于確定成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞的大小。體積的信息對于區(qū)分網(wǎng)織紅細(xì)胞非常重要，根據(jù)定義，未成熟的紅細(xì)胞大于成熟的紅細(xì)胞。

傳導(dǎo)性或射頻測量提供細(xì)胞的內(nèi)部特性信息， 用于區(qū)分體積較小的白細(xì)胞。

3.散點(diǎn)圖和輪廓圖形分析

從體積、傳導(dǎo)性和光散射收集的原始資料反映在三維散點(diǎn)圖上。用曲線分離細(xì)胞群后，血小板和白細(xì)胞被區(qū)分，只留下成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞作進(jìn)一步分析。輪廓圖形分析以一種非線性的方式將網(wǎng)織紅細(xì)胞從成熟紅細(xì)胞中區(qū)分出來，這種非線性方式是沿著細(xì)胞群的曲線而不是直線。

4.網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)

血細(xì)胞分析系統(tǒng)中顯示的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)是用作判斷儀器故障的工具，并有助于對散點(diǎn)圖進(jìn)行解釋。

根據(jù)直方圖顯示的256通道中的體積，傳導(dǎo)性和光散射的分析，可以得到每個(gè)細(xì)胞群落的相關(guān)信息。平均通道值決定了每個(gè)細(xì)胞群落在散點(diǎn)圖中的實(shí)際位置。此外，通過計(jì)算得出的標(biāo)準(zhǔn)差決定了每個(gè)細(xì)胞群落每次檢測的差異程度。平均通道值和標(biāo)準(zhǔn)差都會受到儀器狀態(tài)、增益調(diào)節(jié)、試劑的影響，或者和某些特定的病人樣本相關(guān)。

5.網(wǎng)織紅細(xì)胞報(bào)警

利用復(fù)雜的演算，定位參數(shù)結(jié)合其他細(xì)胞群的統(tǒng)計(jì)保證結(jié)果的完整性并同時(shí)給出網(wǎng)織紅細(xì)胞報(bào)警信息。某些臨床疾病會導(dǎo)致散點(diǎn)圖與已知的成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞群不相符。這些不典型的細(xì)胞群產(chǎn)生的確認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞或異常網(wǎng)織紅細(xì)胞信息以此來提示實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行進(jìn)一步復(fù)查。

網(wǎng)織紅細(xì)胞報(bào)警信息

6.輪廓圖形分析技術(shù)過程

可觀察到一個(gè)有高光散射的細(xì)胞群落，它們的體積均值比網(wǎng)織紅細(xì)胞更接近于成熟紅細(xì)胞。這群細(xì)胞所具有的高光散射的特性與地中海貧血中常見的未完全溶血(影細(xì)胞)的紅細(xì)胞一致。這個(gè)細(xì)胞群可能會因?yàn)榧膊〉漠愒葱院筒∪说臓顩r不同變得不明顯或非常顯著。

鐮狀細(xì)胞標(biāo)本中紅細(xì)胞的形狀和大小多樣，其網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞的體積均值和標(biāo)準(zhǔn)差均會升高。這個(gè)細(xì)胞群可能會因?yàn)榧膊〉漠愒葱院筒∪说臓顩r不同變得不明顯或非常顯著。

正常 鐮形紅細(xì)胞 小體積細(xì)胞

正常和異常網(wǎng)織紅細(xì)胞散點(diǎn)圖

在散點(diǎn)圖中，可觀察到一個(gè)大體積的細(xì)胞顆粒群，它們的光散射均值比網(wǎng)織紅細(xì)胞更接近白細(xì)胞。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這群細(xì)胞是小體積白細(xì)胞群延續(xù)出的一部分，可能是碎片或破碎的白細(xì)胞。

7.網(wǎng)織紅細(xì)胞的相關(guān)參數(shù)

貝克曼庫爾特通過自動的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析和流式細(xì)胞術(shù)測量光散射為網(wǎng)織紅細(xì)胞群提供了更多的細(xì)節(jié)。網(wǎng)織紅細(xì)胞群可進(jìn)一步被分成10個(gè)成熟度。含有最多RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞位于最強(qiáng)光散射區(qū)，3到10區(qū)。

此外，VCS技術(shù)測量網(wǎng)織紅細(xì)胞還可得出以下參數(shù)：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(RET%)和網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值(RET#)，未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)(Immature Reticulocyte Fraction, IRF)，平均網(wǎng)織紅細(xì)胞體積( Mean Reticulocyte Volume, MRV)，平均球形細(xì)胞體積(Mean Sphered Cell Volume, MSCV)，和高光散射網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)(High Light Scatter Reticulocyte, HLR% & HLR#)。

8. 未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù) (IRF)

定義為幼稚的或未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞與總的網(wǎng)織紅細(xì)胞的比值。未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞較大，按照光散射分類就是那些有最強(qiáng)光散射特性，即最多RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞。

9. IRF的臨床應(yīng)用

正常情況下IRF占網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)的不足5%。未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞在大量的促紅細(xì)胞生成素的刺激下會釋放到外周血中，如出血，某些貧血或?qū)Υ碳す撬柙煅委煹姆磻?yīng)。IRF類似于中性粒細(xì)胞的核左移，能夠提供額外的紅細(xì)胞信息，這些信息可以縮短疾病從診斷到治療或單純的治療時(shí)間。

大量文獻(xiàn)已表明，IRF結(jié)合網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)可提高貧血分類，監(jiān)測骨髓恢復(fù)及貧血治療情況。

近年來先進(jìn)的技術(shù)為臨床醫(yī)生提供了更精確的網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和更有價(jià)值的新的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)。最有前景的一個(gè)新參數(shù)是未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)，它在指導(dǎo)臨床實(shí)踐方面具有實(shí)用的臨床意義。此外，MSCV和MCV的相關(guān)性在提示遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥方面有重要的意義。